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瓶子经过常规高压灭菌或常压蒸汽灭菌。待料温降至25以下进行接种，接种过程按无菌操作进行。以接种量填满接种孔为宜。接种后立即移至培养室，温度最好为20C。由于瓶内菌丝生长和吸热，瓶内温度一般比室温高2-4。气温低时，应关闭室内门窗，每5-6小时换气一次。发芽期间要定期更换瓶子。位置，让细菌分布均匀。一般2225天后，菌丝即可布满整瓶。
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